实用器官移植电子杂志 ›› 2021, Vol. 9 ›› Issue (6): 457-462.DOI: 10.3969/j.issn.2095-5332.2021.06.007

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优化的供者来源细胞游离 DNA 检测方法的初步运用

朱代文1,范钰1,巫丽娟2,王雨姗2,林涛1   

  1. 1. 四川大学华西医院泌尿外科 / 泌尿外科研究所,国家老年疾病临床医学研究中心,器官移植中心,四川 成都 610041 ;

    2. 四川大学华西医院实验医学科,四川 成都 610041

  • 出版日期:2021-11-20 发布日期:2022-03-11
  • 基金资助:

    国家自然科学基金(81870513、81470980 和 81600584);

    四川大学华西医院学科卓越发展 1.3.5 工程项目(ZY2016104);

    四川大学青年基金(2017SCU11042);

    中国器官移植发展基金会菁英计划课题研究支持项目(2019JY08);

    国家老年疾病临床医学研究中心(Z20201011)

Preliminary application of an optimized method for detecting donor derived cell-free DNA

Zhu Daiwen1,Fan Yu1,Wu Lijuan2,Wang Yushan2,Lin Tao1.    

  1. 1. Department of Urology,Institute of Urology,West China Hospital,Sichuan University,Organ Transplant Center,Chengdu 610041,Sichuan,China ;

    2. Department of Experimental Medicine,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan,China.

  • Online:2021-11-20 Published:2022-03-11

摘要:

目的报道一种根据中国人群单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)特点优化后的,供者来源细胞游离 DNA(donor derived cell-free DNA,dd-cfDNA) 检测方法在肾移植中的初步运用。方法使用优化选择的8个SNP 位点所形 成 的 dd-cfDNA 检 测 试 剂 盒(Panel HX-8)检测保存的同种异体肾移植受者的血样, 并回顾性分析了受 者 的 临 床 资 料。 根 据 围 术 期 肾功 能 恢 复 情 况 将 受 者 分 为 5 组 :移 植 物 功 能 迅 速 恢 复(immediate graft function,IGF)、 移 植 物 功 能缓 慢 恢 复(slow graft function,SGF)、移 植 物 功 能 延 迟 恢 复(delayed graft function,DGF)、血清肌酐(serum creatinine,Scr) 反 弹(creatinine elevation,CE) 以 及 发 生 抗 体 介 导 排 斥 反 应(active antibody-mediated rejection,ABMR)。 结 果 87 例 受 者 的 总 计 330 份 围 术 期 血 样 被 检 测。 在 其 中 的 84 例 受 者中,IGF 组(n = 73) 的 Scr 和 dd-cfDNA 均 呈 指 数 型 下 降,Scr 在 术 后 第 7 天(postoperative day 7,POD7)达到谷平台值(116.2±33.7)μmol/L,而 dd-cfDNA 在 POD5 提前达到了谷平台值 0.8%±1.5 %。SGF 组(n = 4) 和 DGF 组(n = 2)POD1 的 dd-cfDNA 均 高 于 IGF 组(28.5%±38.8% 比 4.0%±3.3%,P = 0.003 ;9.9%±1.8% 比 4.0%±3.3%,P = 0.083)。CE 组 的 平 均 Scr 从(118.6±22.0)μmol/L(POD7)上涨到了(150.8±25.9)μmol/L(POD12),而平均 dd-cfDNA 则是更早的从 1.4%±0.9 %(POD5)上涨到了5.4%±9.6%(POD7)。另外 3 例受者发生 ABMR,治疗前后平均 dd-cfDNA 为 4.2%±2.0% 比 0.6%±0.1% (P = 0.399)。结论 Panel HX-8 法检测dd-cfDNA 的临床实用性高,且 dd-cfDNA 可能比 Scr 更能敏感地反映移植肾健康状况。将 Panel HX-8 在临床上的广泛应用有待后续研究,以进一步明确检测肾移植受者dd-cfDNA 的临床价值。

关键词:

供者来源细胞游离 DNA , 移植物功能延迟恢复 , 移植物功能缓慢恢复 , 抗体介导排斥反应 , 预后

Abstract:

Objective To report the preliminary application of an optimized method for detecting donor derived cell-free DNA(dd-cfDNA)according to the characteristics of single nucleotide polymorphisms(SNP)in theChinese population. Methods A dd-cfDNA detection method(Panel HX-8)formed by the optimized selectionof 8 SNP was used to test the preserved blood samples from kidney transplant recipients,and the clinical data of therecipients were retrospectively analyzed. These recipients were divided into five groups :immediate graft function (IGF),slow graft function(SGF),delayed graft function(DGF),serum creatinine elevation(CE)and active antibody mediated rejection(ABMR). Results A total of 330 blood samples from 87 recipients were tested. In 84 of these recipients,both serum creatinine(Scr)and dd-cfDNA in the IGF group(n = 73)decreased exponentially while Scr reached a trough plateau value(116.2±33.7)μmol/L by postoperative day 7(POD7)and dd-cfDNA reached an early trough plateau value(0.8%±1.5%)at POD5. The dd-cfDNA on POD1 in the SGF group(n = 4)and the DGF group(n = 2)was both higher than that in the IGF group(28.5%±38.8 % vs. 4.0%±3.3 %,P = 0.003 ;9.9%±1.8 % vs. 4.0%±3.3%,P = 0.083). The Scr in the CE group rose from (118.6±22.0)μmol/L (POD7)to (150.8±25.9)μmol/L(POD12),while mean dd-cfDNA rose earlier from 1.4%±0.9%(POD5)to 5.4%±9.6% (POD7). ABMR occurred in 3 other recipients,with a mean dd-cfDNA of 4.2%±2.0% vs. 0.6%±0.1% before and after treatment(P = 0.399). Conclusion The Panel HX-8 method for detecting dd-cfDNA has high clinical utility and dd-cfDNA may be a more sensitive indicator of transplant kidney graft health than Scr. The widespread use of Panel HX-8 in clinical practice awaits follow-up studies to further clarify the clinical value of detecting dd-cfDNA in renal transplant recipients.

Key words:

Donor-derived cell-free DNA , Delayed graft function , Slow graft function , Activeantibody mediated rejection, Prognosis ,