毕丽丽, 孙玉洁, 孔祥瑞, 高钰, 马锡慧, 韩永, 肖漓, 石炳毅
2017, (2): 112-115. DOI:10.3969/j.issn.2095-5332.2017.02.004
目的 原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原 -G1（human leukocyte antigen-G， HLA-G1） 蛋白，研究 HLA-G1 分子对人 B 淋巴细胞内白细胞介素 -10（interleukin-10， IL-10）表达水平的影响，进 而探究 HLA-G1 在肾移植受者中 B 细胞介导的免疫耐受机制。方法 通过原核表达体系，构建表达并纯 化 HLA-G1 蛋白，经过蛋白免疫印迹试验（Western Blot）鉴定后，与人外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell， PBMC）共培养，利用流式细胞仪检测 B 淋巴细胞内 IL-10 的表达情况。结果 十二烷 基硫酸钠 - 聚丙烯酰氨凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis， SDS-PAGE）、 Western Blot 结果表明，纯化后的蛋白分子量大小约为 38.2 kDa，符合 HLA-G1 蛋白的分子量 ；人 PBMC 与 HLA-G1 蛋白共培养后，随着 HLA-G1 蛋白浓度的升高（浓度梯度 ：0、50、100 和 200 ng/ml），B 细胞内 IL-10 的表达水平明显增加，分别为 0.1%、0.36%、0.57%、0.73%。结论 通过原核表达系统获得 HLA-G1 蛋白，纯度达 95% 以上，HLA-G1 蛋白与人 PBMC 共培养后，可诱导 B 淋巴细胞表达 IL-10，并具有浓度 依赖性，提示其对肾移植免疫耐受的建立具有重要作用。
李雪, 张明超, 陈劲松, 徐峰, 倪雪峰, 程东瑞, 季曙明, 文吉秋
2017, (2): 116-120.
目的 原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原 -G1（human leukocyte antigen-G， HLA-G1） 蛋白，研究 HLA-G1 分子对人 B 淋巴细胞内白细胞介素 -10（interleukin-10， IL-10）表达水平的影响，进 而探究 HLA-G1 在肾移植受者中 B 细胞介导的免疫耐受机制。方法 通过原核表达体系，构建表达并纯 化 HLA-G1 蛋白，经过蛋白免疫印迹试验（Western Blot）鉴定后，与人外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell， PBMC）共培养，利用流式细胞仪检测 B 淋巴细胞内 IL-10 的表达情况。结果 十二烷 基硫酸钠 - 聚丙烯酰氨凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis， SDS-PAGE）、 Western Blot 结果表明，纯化后的蛋白分子量大小约为 38.2 kDa，符合 HLA-G1 蛋白的分子量 ；人 PBMC 与 HLA-G1 蛋白共培养后，随着 HLA-G1 蛋白浓度的升高（浓度梯度 ：0、50、100 和 200 ng/ml），B 细胞内 IL-10 的表达水平明显增加，分别为 0.1%、0.36%、0.57%、0.73%。结论 通过原核表达系统获得 HLA-G1 蛋白，纯度达 95% 以上，HLA-G1 蛋白与人 PBMC 共培养后，可诱导 B 淋巴细胞表达 IL-10，并具有浓度 依赖性，提示其对肾移植免疫耐受的建立具有重要作用。
赵杰, 付迎欣, 冯刚, 莫春柏
2017, (2): 121-125.
目的 探讨致敏患者肾移植术前应用单抗原磁珠法检测到的供者特异性抗体（donor specific antibody， DSA）的平均荧光强度（mean fluorescence intensity， MFI）及类别与术后早期抗体介导排 斥反应（antibody mediated rejection， AMR）的关系。方法 回顾性分析 2012 年 1 月 - 2014 年 1 月天津市 第一中心医院 30 例术前致敏的肾移植患者资料，采用单抗原磁珠法检测术前 DSA，分析术前预存的 DSA 抗体类别及荧光强度与术后早期 AMR 的关系。结果 术前预存 DSA 患者 22 例，单纯Ⅰ类阳性患者 9 例， 单纯Ⅱ类阳性 7 例，Ⅰ、Ⅱ类均阳性 6 例，其中 10 例（45.5%）发生 AMR。比较 AMR 阳性组和 AMR 阴 性组两组间Ⅰ类 DSA MFI 值，Ⅰ类强阳性 DSA（MFI ≥ 8 000）差异有统计学意义（P ＜ 0.05），而两组 间群体反应性抗体（panel reactive antibody， PRA）水平、Ⅱ类 DSA MFI 值差异均无统计学意义（均 P ＞ 0.05）。术前Ⅰ类强阳性 DSA 的 7 例患者中有 6 例（占 85.7%）发生 AMR，而术前Ⅰ类 DSA 轻、中度阳性 （1 000 ＜ MFI ＜ 8 000）的 8 例患者中有 2 例（占 25%）发生 AMR，两者差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。 术前Ⅰ类强阳性 DSA 预测 AMR 的敏感度为 75%，特异度为 85.7%，阳性预测值为 85.7%，阴性预测值 为 75%。结论 术前避开强阳性的Ⅰ类 DSA 能增加致敏患者肾移植的机会，减少术后早期 AMR 的发生。 术前对预存供者特异性抗体分层分析能增加致敏患者肾移植的机会。
王辉, 宋文利, 莫春柏, 王智平, 涂金鹏, 赵杰, 冯刚, 史晓峰, 王振, 付迎欣
2017, (2): 126-129.
目的 探讨离体输尿管镜钬激光碎石联合 Lifeport 灌注处理公民逝世后器官捐献（donation after citizen's death，DCD）供肾结石后肾移植的临床效果。方法 利用输尿管镜下钬激光碎石术处理 DCD 供肾结石 , 右肾结石 5 例，左肾结石 5 例。碎石手术全程供肾置于冰肾脏保存液中，低压、低温冲洗，钬激 光功率为 1.2 ～ 1.6 J/15~20 Hz。碎石后进行 Lifeport 机械灌注，而后行肾移植术，移植肾输尿管与受体膀胱 常规吻合并留置 6 F D-J 管。结果 1 例患者出现移植肾功能延迟恢复（delayed graft function， DGF），所有 患者术后 4 周经膀胱镜拔除 D-J 管，术后随访 3 ～ 22 个月，彩色多普勒超声检查均未见移植肾积水，2 例 患者术后 1 年移植肾结石复发，但移植肾功能稳定。结论 离体输尿管镜钬激光碎石联合 Lifeport 灌注处理 DCD 供肾结石是扩大供肾池的有效方法，临床疗效良好。
陈栋, 卢峡, 朱兰, 宫念樵, 魏来, 王大卫, 陈刚, 明长生, 陈知水, 张伟杰
2017, (2): 130-132.
目的 通过分析病例探讨肾移植术后急性抗体介导的排斥反应（acute antibody-mediated rejection，AAMR）诊断方法和处理原则。方法 分析 4 例肾移植术后 AAMR 的临床诊断和治疗过程。 结果 2 例为术前群体反应性抗体（panel reactive antibody，PRA）阳性，2 例为 PRA 阴性患者，其中 3 例为 公民逝世后器官捐献（donation after citizen's death）来源供体，1 例为亲属母亲供肾。术后出现尿少，血肌酐 升高，经检测 PRA、供体特异性抗体（donor special antibody，DSA）和移植肾穿刺活检联合诊断为 AAMR， 经过应用硼替佐米、血浆置换、输注静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin，IVIG）治疗后，其中 2 例患者移植肾功能恢复正常，2 例未能脱离血液透析治疗。结论 肾移植术后 AAMR 是导致移植肾功能 丧失的主要原因之一，早期诊断和处理是改善预后的关键。
董建辉, 叶常青, 孙煦勇, 秦科, 李海滨, 蓝柳根, 曹嵩, 黄莹, 李美思, 李壮江, 苏庆东, 吴风富, 黄晨, 廖吉祥, 高照, 詹军, 聂峰, 谭庆, 赵月涛
2017, (2): 157-160.