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本期目录

2018 6卷 2期 刊出日期2018-03-20
标准与指南
述评
论著

吴嫣爽, 胡兴琳, 周晓囡, 雷蕾

2018, (2): 93-97. DOI:10.3969/j.issn.2095-5332.2018.02.003

目的 建立人肝癌巴马小型猪异种移植模型,探索人肝癌细胞是否能在猪的肝脏中存活, 为建立人肿瘤细胞异种移植的大动物模型和临床肿瘤治疗、药物试验等研究奠定实验基础。方法 将表达 GFP 的人肝癌细胞通过腹腔镜手术注入 15 只肝部分切除的巴马小型猪的肝实质中。实验分为 3 组(G0 组、 G1 组和 G2 组)。G0 组为对照组,巴马小型猪肝脏实行肝部分切除术后注射生理盐水 ;G1 组巴马小型猪实 施肝部分切除术后注射人肝癌细胞 ;G2 组巴马小型猪实施肝部分切除术后注射人肝癌细胞,术后 12 小时 饲喂免疫抑制剂。定期采集各组实验动物的外周血,检测实验动物天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶 (ALT)的变化,检测血清中是否存在人类甲胎蛋白(AFP)。对巴马小型猪的肝脏进行取材,苏木素-伊红(HE) 染色后镜下观察猪肝组织病理学特征。对实验组进行绿色荧光蛋白(GFP)免疫组织化学染色,检测组织 中是否有人肝癌细胞的嵌合。结果 各组巴马小型猪的 AST 和 ALT 指标在术后 14 天恢复到术前水平。GFP 免 疫组织化学结果显示在 G1 组和 G2 组巴马小型猪的肝脏中均能检测到人肝癌细胞。酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测结果显示在实验组的外周血中可以检测到人 AFP 的表达 , 且 G2 组与 G1 组相比,差异具有统计学意义 〔AFP(μg/L):39.54±20.30 比 13.77±7.52,P < 0.05〕。HE 染色结果显示 G1 组肝组织出现淋巴细胞浸 润和肝细胞坏死。结论 通过猪肝原位移植人肝癌细胞的方法可以建立人肝癌巴马小型猪异种移植模型。 免疫抑制剂能促进移植的细胞存活。

赵越, 徐双悦, 韩蔚民, 庄国洪, 齐忠权,

2018, (2): 98-102.

目的 探讨作为免疫负调控因子的肿瘤诱导坏死因子 -α- 诱导蛋白 8 样因子 -2(TIPE2) 在 T 细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中的潜在作用。方法 通过苏木素 - 伊红(HE)染色和流式细 胞术确定心脏移植物中的主要免疫排斥细胞,免疫荧光染色确定 TIPE2 与脾细胞间的关系,实时定量荧光 PCR(Real-time PCR)检测心脏移植物 TIPE2 及细胞因子表达量。结果 小鼠心脏移植 7 天后心脏组织出 现明显免疫细胞浸润及心肌组织的破坏,流式细胞术检测心脏移植物中 CD4 + 和 CD8+ T 细胞增高,免疫荧 光显示移植小鼠脾细胞中的 CD4+ 和 CD8+ T 细胞表达 TIPE2,而心脏移植物在第 7 天时 TIPE2 和细胞因子 表达量均明显增高。结论 TIPE2 与在 T 细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中可能发挥着潜在作用。

张娟, 付嘉钊, 王路敏, 李艳萍, 江红, 夏俊杰, 齐忠权,

2018, (2): 103-107.

目的 探讨雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司对胰岛的毒性作用。 方法 采用小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)作为体外研究胰岛细胞的对象,分别在含有依维莫司、地磷莫司、 佐他莫司的培养基中孵育 MIN6 细胞 48 小时,通过 Brdu 检测细胞增殖、CCK8 检测细胞活力、PI 检测细胞 周期、流式细胞术检测细胞凋亡以及 ELISA 检测细胞分泌胰岛素功能,观察 3 种雷帕霉素衍生物对 MIN6 细胞的影响。结果 我们发现 3 种雷帕霉素衍生物均会对 MIN6 细胞的增殖和活力产生抑制作用。在细胞 周期和凋亡实验中,与阴性对照组比较,3 种衍生物对 MIN6 细胞的影响呈现抑制 G1 期向 S 期转变的趋势 和促进细胞凋亡的趋势,但差异没有统计学意义。另外,3 种衍生物与雷帕霉素一样,均可减少 MIN6 细胞 分泌胰岛素,差异具有统计学意义。结论 雷帕霉素及其衍生物依维莫司、地磷莫司、佐他莫司均对胰岛 产生一定毒性。

宋红丽, 杨洋, 尹明丽, 郑卫萍, 刘涛, 董冲, 沈中阳

2018, (2): 108-115.

目的 探讨在小肠移植排斥反应中血红素加氧酶 -1(HO-1)是否能增强骨髓间充质干细胞 (BMMSC)对移植免疫功能的影响。方法 建立异位大鼠小肠移植排斥反应模型,实验分为生理盐水组(NS)、 BMMSC 组和 HO-1/BMMSC 组,经阴茎背静脉给予输注 BMMSC 和 HO-1/BMMSC,观察术后各组移植小肠 组织病理、调节 T 细胞(Tregs)、自然杀伤细胞(NK)及细胞因子的改变。结果 小肠移植急性排斥反 应模型组术后 5 天发生轻至中度的急性排斥反应,术后 7 天发生中至重度的急性排斥反应,术后第 10 天 发生重度的急性排斥反应。HO-1/BMMSC 处理组与 BMMSC 处理组相比,显著提高了 BMMSC 保护移植 小肠的作用 ;并且 NK 细胞活性显著下降而 Tregs 水平显著升高 ;细胞因子白细胞介素 -10(IL-10)、转 化生长因子 -β(TGF-β)显著上升而白细胞介素 -2(IL-2)、白细胞介素 - 6(IL-6)、白细胞介素 -17 (IL-17)、白细胞介素 -23(IL-23)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)及 γ- 干扰素(IFN-γ)则显著降低。 结论 HO-1/BMMSC 能够更好地发挥移植免疫抑制作用,HO-1 可增强 BMMSC 抑制小肠移植急性排斥 反应大鼠体内免疫功能的作用。

孙晓叶, 康永振, 沈中阳

2018, (2): 116-120.

目的 探讨肝移植手术过程中血管开放前后供肝能量代谢是否与肝移植术后缺血性胆管损伤 的发生具有相关性。方法 回顾性分析 2014 年 3 月 - 2015 年 8 月天津市第一中心医院 150 例接受原位肝脏 移植手术的患者资料。将满足入组标准的患者于肝移植过程中分别于门静脉开放前、肝动脉开放前及肝动 脉开放后 1 小时取肝组织标本,然后将入组患者随访至 1 年。根据胆道造影结果将其分为缺血性胆道损伤 组(ITBL 组)和非缺血性胆道损伤组(NITBL 组),将两组患者 3 个时间段的 ATP、ADP 及 AMP 定量检测 结果进行分析统计并得出结果。结果 ITBL 组与 NITBL 组在门静脉开放前、肝动脉开放前、肝动脉开放后 3 个时间段的能量代谢相关指标,即 ATP、ADP 及 AMP 含量差异均无统计学意义(P > 0.05)。结论 供肝 组织能量代谢情况与肝移植术后 ITBL 的发生并无相关性。
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