实用器官移植电子杂志 ›› 2022, Vol. 10 ›› Issue (5): 430-434.DOI: 10.3969/j.issn.2095-5332.2022.05.011
Luciference 标记胰岛及在体外和裸鼠体内的荧光表达研究
夏楚睿 1 ,寿辰菲 1 ,金明 2 ,叶泽岚 1 ,宋益康 1 ,章余旋 1 ,傅红兴 1
1. 浙江树人学院树兰国际医学院,浙江 杭州 312028 ;
2. 浙江大学医学院附属第二医院,浙江 杭州 310000)
Luciference-labeled islets and their fluorescence expression in vitro and in vivo of nude mice
Xia Churui1 ,Shou Chenfei1 ,Jin Ming2 ,Ye Zelan1 ,Song Yikang1 ,Zhang Yuxuan1 ,Fu Hongxing1 .
1.Shulan International Medical College Zhejiang Shuren University, Hangzhou 310015,Zhejiang, China ;
2. The Second Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310000, Zhejiang,China.
摘要:
目的 探讨慢病毒 Luciference 标记小鼠胰岛并研究其在体外和裸鼠体内移植后的荧光表达。方法 以感染复数 10 MOI 的慢病毒 -LUC 胰岛培养液转染培养后的 ICR 小鼠胰岛,洗涤后再培养 24 h 后,使用小动物活体光学成像系统观察不同胰岛当量 LUC 标记后的胰岛在体外的荧光表达量,及在体外培养 14 d 内的荧光表达。在裸鼠肾被膜下移植后,观察 30 d 内的体内荧光表达情况。结果 经本方法转染 LUC 基因后的胰岛细胞团活性为(86.7±6.7)% ;在小动物活体成像仪中,体外培养的 LUC 标记胰岛可见有荧光表达,且表达量与胰岛当量有关 ;体外培养 14 d 内的荧光表达强度呈现与时间同步增强的趋势 ;LUC 标记胰岛经裸鼠肾被膜下移植后可见荧光长期表达(> 30 d),但表达的强度随时间变化有较大差异。结论 本研究 LUC 标记的胰岛可实现在活体状态下长期观察移植至体内胰岛的存活情况,可为后续研究胰岛在移植部位的存活和功效提供一定参考。