Abstract:

Objective To report the preliminary application of an optimized method for detecting donor derived cell-free DNA（dd-cfDNA）according to the characteristics of single nucleotide polymorphisms（SNP）in theChinese population. Methods A dd-cfDNA detection method（Panel HX-8）formed by the optimized selectionof 8 SNP was used to test the preserved blood samples from kidney transplant recipients，and the clinical data of therecipients were retrospectively analyzed. These recipients were divided into five groups ：immediate graft function （IGF），slow graft function（SGF），delayed graft function（DGF），serum creatinine elevation（CE）and active antibody mediated rejection（ABMR）. Results A total of 330 blood samples from 87 recipients were tested. In 84 of these recipients，both serum creatinine（Scr）and dd-cfDNA in the IGF group（n ＝ 73）decreased exponentially while Scr reached a trough plateau value（116.2±33.7）μmol/L by postoperative day 7（POD7）and dd-cfDNA reached an early trough plateau value（0.8%±1.5%）at POD5. The dd-cfDNA on POD1 in the SGF group（n ＝ 4）and the DGF group（n ＝ 2）was both higher than that in the IGF group（28.5%±38.8 % vs. 4.0%±3.3 %，P ＝ 0.003 ；9.9%±1.8 % vs. 4.0%±3.3%，P ＝ 0.083）. The Scr in the CE group rose from （118.6±22.0）μmol/L （POD7）to （150.8±25.9）μmol/L（POD12），while mean dd-cfDNA rose earlier from 1.4%±0.9%（POD5）to 5.4%±9.6% （POD7）. ABMR occurred in 3 other recipients，with a mean dd-cfDNA of 4.2%±2.0% vs. 0.6%±0.1% before and after treatment（P ＝ 0.399）. Conclusion The Panel HX-8 method for detecting dd-cfDNA has high clinical utility and dd-cfDNA may be a more sensitive indicator of transplant kidney graft health than Scr. The widespread use of Panel HX-8 in clinical practice awaits follow-up studies to further clarify the clinical value of detecting dd-cfDNA in renal transplant recipients.

Key words:

Donor-derived cell-free DNA , Delayed graft function , Slow graft function , Activeantibody mediated rejection, Prognosis ,

摘要：

目的报道一种根据中国人群单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）特点优化后的，供者来源细胞游离 DNA（donor derived cell-free DNA，dd-cfDNA） 检测方法在肾移植中的初步运用。方法使用优化选择的8个SNP 位点所形 成 的 dd-cfDNA 检 测 试 剂 盒（Panel HX-8）检测保存的同种异体肾移植受者的血样， 并回顾性分析了受 者 的 临 床 资 料。 根 据 围 术 期 肾功 能 恢 复 情 况 将 受 者 分 为 5 组 ：移 植 物 功 能 迅 速 恢 复（immediate graft function，IGF）、 移 植 物 功 能缓 慢 恢 复（slow graft function，SGF）、移 植 物 功 能 延 迟 恢 复（delayed graft function，DGF）、血清肌酐（serum creatinine，Scr） 反 弹（creatinine elevation，CE） 以 及 发 生 抗 体 介 导 排 斥 反 应（active antibody-mediated rejection，ABMR）。 结 果 87 例 受 者 的 总 计 330 份 围 术 期 血 样 被 检 测。 在 其 中 的 84 例 受 者中，IGF 组（n ＝ 73） 的 Scr 和 dd-cfDNA 均 呈 指 数 型 下 降，Scr 在 术 后 第 7 天（postoperative day 7，POD7）达到谷平台值（116.2±33.7）μmol/L，而 dd-cfDNA 在 POD5 提前达到了谷平台值 0.8%±1.5 %。SGF 组（n ＝ 4） 和 DGF 组（n ＝ 2）POD1 的 dd-cfDNA 均 高 于 IGF 组（28.5%±38.8% 比 4.0%±3.3%，P ＝ 0.003 ；9.9%±1.8% 比 4.0%±3.3%，P ＝ 0.083）。CE 组 的 平 均 Scr 从（118.6±22.0）μmol/L（POD7）上涨到了（150.8±25.9）μmol/L（POD12），而平均 dd-cfDNA 则是更早的从 1.4%±0.9 %（POD5）上涨到了5.4%±9.6%（POD7）。另外 3 例受者发生 ABMR，治疗前后平均 dd-cfDNA 为 4.2%±2.0% 比 0.6%±0.1% （P ＝ 0.399）。结论 Panel HX-8 法检测dd-cfDNA 的临床实用性高，且 dd-cfDNA 可能比 Scr 更能敏感地反映移植肾健康状况。将 Panel HX-8 在临床上的广泛应用有待后续研究，以进一步明确检测肾移植受者dd-cfDNA 的临床价值。

关键词:

供者来源细胞游离 DNA , 移植物功能延迟恢复 , 移植物功能缓慢恢复 , 抗体介导排斥反应 , 预后